【バイオマーケットjp】ExoIntact Exosome 精製試薬キット 簡便かつ高純度なエクソソーム精製試薬キット|HMTバイオメディカル

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ExoIntact Exosome 精製試薬キット

簡便かつ高純度なエクソソーム精製試薬キット

出展企業:HMTバイオメディカル株式会社

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インタクトに精製が可能
ExoIntact Exosome 精製試薬キットのイメージ
ExoIntact Exosome 精製試薬キット

本キットは、リン脂質に親和性の高いペプチドと磁性ビーズを利用して、エクソソームや他の細胞外小胞を精製するキットです。

加えて、磁性ビーズを用いることにより、元サンプルからのキャリーオーバーを極力排除できるため、高精度なエクソソーム分析や機能解析に最適です。

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ExoIntact Exosome 精製試薬キットの特徴

リン脂質親和性ペプチドと磁性ビーズの組み合わせ 穏和な溶出条件を採用:機能性を維持したエクソソームが取得可能 様々なアプリケーションに利用可能

Exosome とは
ほぼ全ての細胞から分泌される直径30~150nmの微粒子。脂質二重膜構造を有し、血液・尿・母乳・唾液などあらゆる体液に含まれる。近年エクソソーム内にマイクロRNA(miRNA)、核酸、蛋白質等多くの生体分子が含まれていることが明らかになり、その機能として細胞間の情報伝達等がある。エクソソームを産生する細胞によって、分泌されるエクソソームの特徴(膜表面蛋白質・含有分子・分泌量など)が異なることが知られており、エクソソーム自体もしくはエクソソーム含有分子をバイオマーカーとして利用する研究が盛んに進められている。例として、がんの早期発見マーカーとしての応用が挙げられる。
 
Applications of GeneCopoeia Endofectin Transfection Reagents

ExoIntactと従来法における精製純度比較

ヒト血清からエクソソームを精製後、各精製法間で同じ濃縮率(出発量から2倍濃縮)となるように調製し、等量を下流アッセイに供した。各精製法の純度比較は、定量PCRのCt値より算出したエクソソーム相対量と、BCA法により得られたたんぱく質濃度の比率(純度)により行った。
 
方法 [1] エクソソーム相対量 (Ct) #1 [2] たんぱく質濃度 (μg/mL) 純度
([1] / [2])
相対純度 所要時間(h)#2
ExoIntact 1.00
(32.52)
45 2.2E-02 10491 2.0
超遠心 0.25
(34.50)
15018 1.7E-05 8 2.5
ポリマー沈殿法 0.09
(35.93)
44815 2.1E-06 1#3 1.5

#1:標的配列:hsa-miR-142-3p  #2:前処理済み試料を用いた場合
#3:相対純度はポリマー沈殿法が1となるように規格化を行った。
従来法と比較して、ExoIntactはエクソソーム相対量が多く、たんぱく質濃度が極めて低いことが明らかとなった。従って、相対純度は数千から一万倍となり、夾雑たんぱく質が少ない状態でエクソソームを回収できていることが示唆された。また、所要時間でも従来法と遜色がなかった。

粒度分布:qNano

ExoIntactによるエクソソーム精製後、Elution BufferをPBSにバッファー交換して、qNanoにより測定した。

TEM image

ExoIntactで精製したエクソソーム溶液をTEMにより観察した。
 
球形の粒子が観察され、その直径は75、160 nmであった。すなわち、ExoIntactでは形状を維持したエクソソームが得られた。

操作方法

マグネットさえあれば、マイクロピペット等一般的な器具ですぐに行うことが出来、わずか2時間程度(当社調べ)で精製が可能。

希望小売価格

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ExoIntact
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2019年06月19日 現在
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